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第一章 绪论
第二章 实验研究的基本要素及人员条件
第三章 文献综述及文献检索
第四章 科学研究的选题和设计
第五章 数据的记录于处理
第六章 实验报告与论文的撰写
第七章 医学实验的数学建模
第八章 基础医学实验常用仪器及器件
第九章 医学实验动物及其操作技术
第十章 血液流变学检测
第十一章 膜片钳技术
第十二章 组织细胞培养技术
第十三章 染色体分析技术
第十四章 分子生物学技术
第十五章 免疫学技术
第十六章 细菌学实验技术
第十七章 组织学技术
第十八章 流式细胞术及其应用
第十九章 电镜技术与生物医学超微结构
第二十章 激光扫描共聚焦显微镜技术
第二十一章 模拟实验
第二十二章 生理学实验
第二十三章 药理学实验
第二十四章 形态学实验
第二十五章 分子生物学实验
第二十六章 微生物学实验
第二十七章 免疫学实验
第二十八章 医学化学实验
第二十九章 药学实验
第三十章 实验动物行为学实验方法
第三十一章 综合实验
附录

 
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第五节 752C型紫外可见分光光度计
2009-06-02 15:44  
      752C型紫外可见分光光度计是继752型光栅分光光度计后又一个改型的仪器。它以全新完善的设计,采用了微计算机技术,大大提高了仪器的性能,可广泛应用于医药卫生、临床检验、生物化学等部门,是现代化分析实验室多种分光光度定量分析需要的低价格、高性能分光光度计。752C型紫外可见分光光度计外形图和后视图分别如图8-10和图8-11所示。

8-10

8-11

1. 仪器结构与工作原理

752C型紫外可见分光光度计采用单光束自准式光路,色散元件为衍射光栅,光学系统如图8-12所示。

由光源发出的连续辐射光线,经滤光片和球面反射镜至单色器入射狭缝处聚焦成像,光束通过入射狭缝,经平面反射镜到准直镜,产生平行光射至光栅,在光栅上色散后,又经准直镜聚焦在出射狭缝上成一连续光谱,由出射狭缝射出一定波长的单色光,通过标准溶液再照射到光电管上。

调整“100%”旋钮,使透光率为“100%”,然后移动试样槽,使同一单色光通过被测样品后照射到光电管上,如果被测的样品有吸收现象,则光能量会发生变化(减少),此时,由于放大器的作用,其光能量的变化情况通过计算机由6位数字显示器反映出来,可以直接读出透光率T或吸光度A、浓度C

752C型紫外可见分光光度计由光源室、单色器、试样室、光电管、微电流放大器、计算机、稳压电源部件组成。仪器的工作原理方框图见图8-13

1)光源室:光源室由光源和反射镜、滤光片等组成,光源由钨卤素灯和氢灯(或氘灯)组成,氢灯作为200330nm的光源,钨卤素灯作为330850nm的光源,旋转单色器波长手轮,可自动切换光源和滤光片,滤光片用以消除二级光谱,光源室用螺灯固定在单色器的侧壁上,打开光源室盖板,即可更换光源。

2)单色器:单色器由色散元件,狭缝、反射镜、准直镜、光栅转动机构、波长拔示盘等组成,色散元件采用1200线/mm的衍射光栅,单色器上方有波长指示及波长手轮,转动波长手轮可以改变波长读数值。

3)试样室:试样室内有可装四只比色皿的托架,拉动拉杆可以依次更换试样槽位置,试样室与光电管之间有一光门,将它们隔开,打开试样室盖,光门自动关闭,关上试样室盖,则光门自动打开。

4)光电管、微电流放大器:光电管和微电流放大器同装在密闭暗盒内,装有硅胶(干燥器)的小筒可伸入该盒内,硅胶失效后可自行更换,此干燥筒安装在仪器的左部。

光电管采用国产的端窗式多碱阴极真空管,其光谱范围为190860nm

光信号由光电管接受后通过高值电阻转换成微弱的电信号,再经微电流放大器加以放大后,在数字显示器上读出,微电流放大器采用了输入阻抗高于1.5×1012n的低漂移运算放大器,使仪器的稳定性大大提高。

5)计算机:计算机是一个专用的小系统,它可完成以下几种功能:①AD变换;②T-A转换;③T.A.C显示;④DA变换;⑤测量选择;⑥浓度设定。其中AD变换速度为1030次/秒,变换精度为0.00025VDA变换器为14位精度。上述功能和变换器指标完全能满足仪器的测量要求。

6)稳压电源:稳压电源包括±12V电源和氢灯稳流源。

2. 仪器的安装方法及要求

1)仪器应安装在整洁干燥的房间内,使用时应放置在平稳的工作台上,室内照明不宜过强。

2)供给仪器的电源,其最大变化范围不超过220±10%,并必须装有接地线。

3. 仪器的操作方法及注意事项 仪器经运输,搬运后,所引起的光源偏移,可进行必要的调整。

1)将灵敏度旋钮调置“1”挡(放大倍率最小)。

2)按“电源”开关,开关内2只指示灯亮,钨灯点亮;按“氢灯”开关,开关内左侧指示灯亮,氢灯电源接通,再按“氢灯触发”按钮,开关内右侧指示灯亮,氢灯点亮,仪器预热30分钟。(注:仪器后背部(图8-11)有一只“钨灯开关”,如不需要用钨灯时可将它关闭)

3)选择开关置“0%100%”挡。

4)打开试样室盖光门自动关闭,调节“0%”(T)旋钮,使数字显示为“0000”,(零点调节正确方法应是显示负号一息一亮)。

5)将波长置于所需要测的波长。

6)将装有溶液的比色皿放置比色皿架中。(注:波长在360nm以下时,必须用石英比色皿)。

7)盖上样品室盖,将参比溶液比色皿置于光路,调节透光率,“100”旋钮,使数字显示为1000%(T)(如果显示不到1000T,则可适当增加灵敏度的挡数,同时应重复“4”,调整仪器的“0000”)

8)将被测溶液置于光路中,数字显示器上直接读出被测溶液的透光率(T)值。

9)选择开关使用方法:

1)“0%100%”:最小分辨率为0.1%。

2)“0%40%”:最小分辨率为0.01%,然后将选择开关置于040%挡。

3-0.33A:最小分辨率为0.0001A,将选择开关置于“-0.33A”挡,这时数字显示为“0000”,然后移入被测溶液,显示值即为试样的吸光度A值。

400.6A:最小分辨率为0.0001A,将选择开关置于“00.6A”挡,这时数字显示为“0.0000”,然后移入被测溶液显示值即为试样的吸光度A值。

5CONC:量程06500,选择开关置于“CONC”挡,将已标定的浓度的溶液移入光路,按浓度设定按钮,同时调节浓度设定旋钮,使得数字显示为标定值,将被测溶液移入光路,即可读出相应的浓度值。

10)如果大幅度改变测试波长时,需要等数分钟后,才能正常工作。这是因为波长由长波向短波或短波向长波移动时,光能量变化急剧,使光电管受光后响应缓慢,需一段光响应平衡时间。

11)仪器在使用时,应常参照本操作方法中“4”和“7”进行调“0000”和 “1000”的工作。

12)每套仪器所配套的比色皿不能与其他仪器上的比色皿单个调换。

13)本仪器数字显示后,背部带有外接插座(图8-11)可输出模拟信号,插座1脚为正接地线,2脚为负接地线,T置于0%100%挡,显示T100%时则模拟输出信号为0.25V

14)仪器使用完毕后,用随机提供的塑料套罩住,在套子内应放数袋硅胶,以免灯室受潮、反射镜发霉或沾污影响仪器性能。

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