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第三章 文献综述及文献检索
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第五章 数据的记录于处理
第六章 实验报告与论文的撰写
第七章 医学实验的数学建模
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第九章 医学实验动物及其操作技术
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第十二章 组织细胞培养技术
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第十四章 分子生物学技术
第十五章 免疫学技术
第十六章 细菌学实验技术
第十七章 组织学技术
第十八章 流式细胞术及其应用
第十九章 电镜技术与生物医学超微结构
第二十章 激光扫描共聚焦显微镜技术
第二十一章 模拟实验
第二十二章 生理学实验
第二十三章 药理学实验
第二十四章 形态学实验
第二十五章 分子生物学实验
第二十六章 微生物学实验
第二十七章 免疫学实验
第二十八章 医学化学实验
第二十九章 药学实验
第三十章 实验动物行为学实验方法
第三十一章 综合实验
附录

 
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第四节 人体心功能实验
2009-06-02 13:53  

一、心泵功能的“双信息图”显示法

【实验目的】

学习心导管插管术及利用计算机进行左心室内压分析的方法。

【实验原理】

心脏的功能在于泵血,它的机能状态可用心率、压力、流量、功率等来描述。

在心泵功能的研究中,往往将两种不同力学特性的信息展现在两维平面上,以表达心泵功能所处的状态,称为心泵功能的“双信息图”显示法,即Lissajous图显示法。

本实验记录左心室内压(LVP),并求得心室内压的变化率(dP/dt)。程序自动判别心动周期,进而运用“双信息图”显示法绘制心力环(P-dP/dt环)和收缩速度环。

根据LVP、dP/dt、P-dP/dt环,程序计算得到常用的十余项参数,这些参数可用以评判左心室泵血功能的状态。

22-1列举了左心室内压分析的主要参数及其定义。

22-10为左心室内压分析主要参数计算方法图解。

A为一个周期的心室内压波形。

B为心力环。以dP/dt max和 -dP/dt max为界,将心力环分成4部分,分别用梯形积分法或辛普生积分法求得各块面积(L1~L4)。

C为心肌收缩成分缩短速度环,Y轴的量值由公式求得,式中k为缩短速度系数,在家兔,一般取40。在左心室的收缩期,可寻找到Vpm;过dP/dt max与Vpm两点作直线交于Y轴,其交点即为Vmax。

【实验对象】

家兔。

【试剂与器材】

哺乳动物手术器械一套,生物信号处理系统,1m 长橡皮管一根,20%氨基甲酸乙酯溶液,0.1%肝素溶液,1:100 000肾上腺素溶液,1:100 000去甲肾上腺素溶液,心得安。

【实验方法与步骤】

1. 动物称重、麻醉及气管插管。

2. 分离右侧颈总动脉鞘,游离出右侧颈总动脉长约0.5~2cm,在该动脉下穿两根线,一根在尽可能靠近头端处将动脉结扎;另一根留作固定心导管用。用动脉夹在尽可能靠近心脏端处夹闭总动脉,然后用眼科剪刀在头端结扎处下约0.3cm的动脉壁上剪一个半斜切口,准备插心导管用。

3. 心导管与血压换能器相连,并用肝素溶液充灌心导管,排除心导管与血压换能器中的气泡,备用。

4. 插入心导管 于家兔左胸前触摸到心尖波动最明显处,测量此点到右侧颈总动脉切口的距离,并将该段距离标记在塑料导管上,以便掌握导管推进的最大深度。

将充满肝素溶液的心导管经右侧颈总动脉切口插入动脉腔内,直至动脉夹处,将备用线打一松结。然后用左手拇指和食指捏住动脉和插在里面的导管,右手慢慢放开动脉夹,如有血液由切口流出,可再次夹住动脉夹并将松结稍稍扣紧,再放开动脉夹。放开动脉夹后,立即将导管缓缓向动脉腔内推进。推进导管时,应根据动脉走向而改变推进的方向和力度,以防止导管刺破动脉壁而造成动物死亡。

插管时,速度应尽可能缓慢,用力应适度,当推进阻力较大时,可采用退退进进,不断改变方向的办法插入。插管时,应密切注视计算机屏幕上显示的血压波形,以判断导管所处的位置与状态。

根据塑料导管上的距离标记可估计导管离左心室的距离,一般情况下,当导管尖端进入主动脉瓣入口处时,有明显的抵触、抖动感,此时稍加用力,突然产生一个突破感时,即表示导管已进入左心室内,计算机屏幕上所显示的波形会有明显变化(舒张压下降到0mmHg上下)。

用备用线结扎心导管,并将心导管固定于近旁活动度较小的组织上或气管插管上。

5. 连接实验装置,运行实验程序。

6. 记录静息状态下家兔左心室压力曲线,并求得心泵功能的各项参数,作为前对照。

7. 于耳缘静脉注入1:10 000肾上腺素溶液0.2~0.5ml,观察心泵功能的变化。

8. 静脉注射1:10 000去甲肾上腺素溶液0.2~0.5ml,观察心泵功能的变化。

9. 观察长管窒息时心泵功能的变化。

10. 静脉注射心得安0.3ml后,观察心泵功能的变化。

【注意事项】

1. 心室导管的硬度和直径要合适,尖端不能太尖锐。

2. 插管时,应根据动脉走向而改变推进的方向和力度,用力应适度,以防止导管刺破动脉壁而造成动物死亡。

3. 插管时,应密切注视计算机屏幕上显示的血压波形,以判断导管所处的位置与状态。

4. 各观察项目之间,需使动物休息足够时间,并作好前、后对照。

 

(曹银祥)  

 

二、人体心率变异性和压力反射敏感性分析

【实验目的】

了解人体心率变异性(Heart Rate Variability, HRV)和压力反射敏感性(Baroreflex Sensitivity, BRS)的生理机制,增加对无创伤性检测方法的感性认识。

【实验原理】

人体心血管、胃肠道、支气管、汗腺以及胰岛、甲状腺、肾上腺等内分泌腺体功能均受自主神经的调节。许多疾病可造成自主神经的损害和功能失调,而自主神经的损害和功能失调又是许多疾病的发生原因之一。过去一直认为整齐的心律是健康心脏的指标之一,但现在认识到绝对整齐的心律是病态的。临床研究证实冠心病、心绞痛、心肌梗死、心脏性猝死、充血性心衰、尿毒症等患者心率变异性(Heart Rate Variability, HRV)明显低于正常人,心梗后心律失常事件及心源性死亡率与HRV降低程度显著相关。HRV与心功能、晚电位、电生理检查等组合可大大提高对心梗患者近期和远期危险分层的可靠性。

近十余年来,压力反射敏感性(Baroreflex Sensitivity, BRS)分析在心血管疾病研究方面的应用也日益广泛。

压力反射系统是心血管系统调节的重要部分,其中迷走神经和交感神经对心脏、血管的影响尤为重要。压力感受器主要存在于颈动脉窦和主动脉弓,当压力较高时刺激压力感受器,增加副交感张力、降低交感张力,而导致心率、心指数的降低和血管扩张,最终使血压下降到正常范围。这种调整径路的有效性,即压力反射敏感性,可通过心率变化来了解。尽管自主神经系统的两种成分均影响心率,但压力反射敏感性主要反映副交感神经的反射能力。

提取一定时段的心电RRI(R波间期,R-R Interval)和对应的动脉血压(收缩压、舒张压或平均压),并对RRI和BP数字序列作时域和频域分析,可求得它们的均方差(TV)、标准差(SD)、功率谱密度(PSD)、低频成分(LF)、高频成分(HF)、高低频之比(LF/HF)以及两者的相关函数(Coherence)和压力反射敏感性(BRS)等参数。

对于功率谱分析,比较一致的观点是:功率谱密度曲线中0.25Hz (约4次心跳一个周期)左右的高频成分与副交感神经有关(主要与呼吸运动有关),而0.1Hz(约10次心跳一个周期)左右的低频成分则与交感及副交感神经均有关。近来Lumbardi等在动物实验中观察到心交感神经具有与LF相同的发放变异,故认为LF主要与交感活动有关。LF/HF反映了交感神经和迷走神经的调节平衡,正常人安静时降低,应激时升高。

HRV和BRS分析为检查自主神经的调节功能和中枢整合功能提供了一种非创伤性的方法,除了可用来检查冠心病、糖尿病、肾衰竭等疾病患者自主神经的损害程度外,还可用于评判疲劳、衰老的程度,在专业择员和老年病防治等方面均有较大用途。

1. HRV和BRS分析方法

R-R间期(RRI)和动脉收缩压(SBP)的检测方法见图22-11。程序根据心电信号的变化率和时程自动检测心动间期,并将各心动周期内的最大值,即收缩压检测出来,由此得到两两对应的RRI和BP数字序列。

2. 常用的分析方法和主要参数

1)时域 分析(time-domain analysis,  TDA)

① 简易测量法。利用最长RRI和最短RRI的差来作为HRV的指标。如用于胎儿心率的研究。

RRI的方差和标准差(Standard deviation, SD)。RRI数据一般为256个或512个, 也可以长达24小时。正常人24小时SD通常>50ms。

SD的变异系数 (Coefficient of variation , CV)  CV可排除被测者固有心率的差异, 增加可比性。

R-R间期跳跃指数  求出相邻RRI的差值, 按每小时计算出超过某一预定值(一般50ms)的RRI频数, 并绘制曲线, 曲线波动代表迷走神经活动。

HRV指数  某一时间内RRI总数目/占比例最大的RRI的数目。正常人通常大于25。  

2)频域分析(frequency-domain analysis,  FDA)

采用快速富立叶变换(Fast Fourier Transform, FFT)或自回归模型(Autoregressive, AR), 求出功率谱密度(Power Spectral Density, PSD), 继而计算出各频率成分的绝对值和标准化单位。

自回归模型(AR)较之FFT算法具有较高的分辨率, 自回归模型(AR)有Burg、Marple等递推算法。

① 功率谱密度的幅值单位

功率谱密度的单位为ms2/(Cycle/Beat,c/b)或ms2/Hz。其标准化单位(Normalized Unit , NU)根据以下公式求得:

LF(NU) = LF(绝对值) / ( PSD曲线总面积-DC ) × 100

HF(NU) = HF(绝对值) / ( PSD曲线总面积-DC ) × 100

式中DC为频谱中的直流成分。

② 功率谱密度的频率单位

功率谱密度的频率单位为Cycle/Beat,用下式可将其单位转换成Hz(次/秒)。

F(Hz)= 1000 × F(Cycle/Beat) / PPImean(RRI的均值)

LF和HF的划分

低频(0.03~0.1 Cycle/Beat),中频(0.1~0.2 Cycle/Beat),高频(0.25 Cycle/Beat左右,根据呼吸频率决定)。

3)其他观察方法

① 直方图  求出TV、10%TV、50%TV等。

② 相平面图(轨迹图)。

22-12为RRI 和HRV的分析曲线图。 

3. 健康人安静时TV和LF/HF正常值调查结果

调查发现,幼儿期至30来岁的健康人安静时HRV参数随年龄呈缓慢变化的过程,40岁以后的健康人安静时的HRV参数也随年龄呈缓慢变化的过程。

22-2列出了TV和LF/HF正常值调查结果。

【实验对象】

人体。

【实验器材】

生物信号处理系统,“HRV和BRS分析”软件。

【实验方法与步骤】

1. 开启生物信号处理系统,心电图导联线连接到第一通道,脉搏换能器连接到第二通道。

2. 被试者取仰卧位,清洁心电图电极板接触处皮肤,导联线的接地端接被试者右下肢,两个记录端分别接左上肢和右上肢。脉搏换能器安放在桡动脉搏动处,固定束带、调节好松紧。

3. 运行“HRV和BRS分析”软件,在采样界面观察心电和脉搏波形。设置好放大器时间常数和高频滤波,根据波形大小调节放大器增益。如R波与其他波群在幅度上区别不大,可改变心电导联。

放大器参数设置如下:

时间常数:心电2s~0.2s,脉搏DC~2s。

高频滤波:心电和脉搏均取300~500Hz。

增益:心电1000~5000倍,脉搏100~400倍。

4. 被试者安静休息10~20min,保持呼吸平稳,不能闭眼睡觉。用水银血压计测量被试者血压,调用程序“定标”功能,在定标对话框内输入测得的收缩压和舒张压,使脉搏波幅度得到定标。

5. 记录一段信号,信号长度一般为256~4096个心动周期,根据实验需要设定。

6. 稍事休息后,让被试者做心算,或给予冷刺激(手指浸入冷水中),再记录一段信号。

7. 分析HRV和BRS,将结果填入表22-3中。

【注意事项】

1. 测量前数小时不能服用镇静药,测量前1小时内不饮用兴奋性饮料。

2. 若使用冷水浸泡手指作为刺激方法,冷水的温度应控制在4℃左右。

3. 测试过程中,被试者应保持放松,以避免肌电干扰;安放脉搏换能器的手腕应保持稳定,以防因束缚力的变化而造成压力误差。

4. 测试环境应保持安静,室温在25℃左右为宜。

 

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