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一种四环素严紧调控的真核表达载体
2009-05-19 10:03   发布范围:公开

一种四环素严紧调控的真核表达载体(申请号200910021010.2). 于军,陈宝莹,陈健康,刘利兵,张学策,刘芳娥,梁向艳,杨芳,黄小军. 发明专利.

摘要:一种四环素严紧调控的真核表达载体,其分别引入如下DNA元件:hCMV、rtTA2S-M2、IRES、EGFP-Puro、编码萤光素酶的元件(Luc)和Ptetbi-RFC,应用于外源性兴趣基因在真核细胞中的表达和筛选。该载体转染后受到Tet或Dox严紧控制,并且基因的表达水平通过加入Tet或Dox的量进行定量调节;通过检测Luc萤光素酶的活性就可以间接检测兴趣基因的表达水平;载体的转染效率可以通过检测绿色荧光细胞的比例来完成;稳定转染的细胞通过流式细胞仪分选,使得确定兴趣基因的表达简洁、方便;而且所筛选得到的稳定细胞系,兴趣基因已经整合于宿主的基因组,具有长期稳定表达的特性和优势。
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